Modello di colite indotto da cellule T
🔍 PERCHÉ È UTILE? Il modello di colite indotto da cellule T riproduce molte delle caratteristiche clinico-patologiche osservate nelle IBD. Un grande vantaggio di questo modello è la sua utilità nello studio dei meccanismi immunologici alla base dell’infiammazione intestinale cronica.Può essere anche utilizzato per valutare il ruolo di diverse popolazioni linfocitarie, citochine e proteine espresse durante l’ induzione e durante il cronicizzarsi della malattia.
🔍 COME FUNZIONA IL MODELLO? Nel dettaglio, il trasferimento adottivo di cellule CD4⁺ naive CD45RBhigh (cellule naive, prive della popolazione regolatoria Treg) da topi wild-type sani in topi riceventi singenici privi di cellule T e B (es. RAG knockout) induce colite estesa e infiammazione dell’intestino tenue dopo circa 5–8 settimane dal trasferimento.1-3
Al contrario, i topi di controllo che ricevono cellule CD4⁺ CD45RBlow (popolazione contenente Treg), non si sviluppa colite: i topi rimangono in salute e non si osserva attivazione delle cellule T nella lamina propria.
La durata del modello è di circa 2 mesi, durante i quali clinicamente, i topi presentano perdita di peso, feci molli e diarrea, riproducendo i sintomi tipici della patologia umana.
Dal punto di vista istopatologico, il colon distale dei topi con malattia attiva mostra:
Erosioni ed iperplasia della barriera epiteliale, ed infiammazione transmurale con massiccio infiltrato di cellule immunitarie, tutte caratteristiche molto simili a quelle riscontrabili nei pazienti con IBD.
PARAMETRI VALUTATI
1) Parametri clinici: Perdita di peso corporeo e Disease Activity Index (DAI)
2) Lunghezza del colon
3) Analisi istopatologica con RACHMILEWITZ(4) score
4) ANALISI IMMUNOISTOCHIMICHE. Eseguiamo di routine analisi immunoistochimiche su qualunque tipo di tessuto murino, incluso quello intestinale
5) ANALISI AGGIUNTIVE: FACS su popolazioni leucocitarie, endoteliali ed epiteliali, RNAsequencing, Metagenomica, Lipidomica, Aanalisi bioinformatiche integrate, Multiplex Immunoassay, RT-PCR, KIT ELISA per citochine e chemochine.
(4) Yang W et al. Inflammatory Bowel Diseases 2023; 29(10); 1673-1680. 2. Rajaraman E et al. Methods Mol Bio 2012: 844; 261-275. 3. Ostanin D et al. Am J Physiol Gastrointest Liver Physiol 2008; 296(2): G135-G146. 4. Rachmilewitz, D. et al. Gastroenterology 2002; 122: 1428–1441.